體外培養細胞的增殖活力受多種因素的影響，如某些細胞因子可促進(jìn)細胞的增殖，而一些藥物如抗癌藥物則可抑制細胞的生長(cháng)，甚至誘導細胞的死亡。目前，細胞活力檢測方法中，CCK8法是一種方便、靈敏、快速、無(wú)放射性、重復性好檢測方法。

此外，CCK8檢測亦可用于繪制細胞的生長(cháng)曲線(xiàn)，一定數量的細胞接種后，連續測量7天的吸光度，然后將7天測量所得的吸光度值標于坐標紙上，再將各點(diǎn)連成曲線(xiàn)，即可得生長(cháng)曲線(xiàn)。

包裝清單：

CCK8細胞增殖檢測試劑盒儲存條件：

-20℃保存，二年有效；4℃保存，一年有效

操作說(shuō)明：

1、細胞活性檢測

① 在96孔板中接種適量的細胞懸液（100ul/孔），在培養箱中培養24小時(shí)；

② 向每孔中加入10ul CCK-8溶液；

③ 繼續放于培養箱中培養1-4小時(shí)；

④ 用酶標儀測定在450nm的吸光度。

2、細胞增殖-毒性檢測

① 在96孔板中接種適量的細胞懸液（100ul/孔），在培養箱中培養24小時(shí)；

② 在96孔板中加入不同濃度的生長(cháng)因子、細胞因子或藥物等；

③ 將96孔板置于培養箱中培養適當的時(shí)間；

④ 向每孔中加入10ul CCK-8溶液；

⑤ 繼續放于培養箱中培養1-4小時(shí)；

⑥ 用酶標儀測定在450nm的吸光度。

注意事項

1、向96孔板接種細胞時(shí)，應前后、左右搖晃培養板，使細胞在孔中分布均勻，避免細胞堆集在孔的中央生長(cháng)。

2、CCK-8 的培養時(shí)間一般為 1-4 小時(shí)，但在培養 30 分鐘左右即可取出肉眼觀(guān)察顯色程度，根據細胞種類(lèi)而定，需要摸索條件，CCK-8 的最佳反應時(shí)間以具體顯色的最佳時(shí)間為準。

3、加入CCK8溶液時(shí)避免氣泡的產(chǎn)生，從而影響吸光度。

酶標儀讀取吸光度時(shí)可使用430-490nm之間的濾光片，但450nm 濾光片的檢測靈敏度最高。

4、CCK8的檢測依賴(lài)于脫氫酶催化的反應，所以還原劑（例如一些抗氧化劑）會(huì )干擾檢測，如干預因素具有還原性，應在檢測前通過(guò)換液的方法予以去除。

5、培養基中酚紅對吸光度的影響，可以通過(guò)扣除空白孔中本底的吸光度而消除，因此，不會(huì )對檢測結果造成影響。

6、所測吸光度值范圍應在0.4-2之間，此范圍內的吸光度值與細胞的數量與活力之間的線(xiàn)性關(guān)系較為明顯，如果超出此范圍，應相應增加或減少接種細胞的數量。

備注：

         產(chǎn)品信息可能會(huì )有優(yōu)化升級，請以實(shí)際標簽信息為準。

本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。

為了您的安全和健康，請在實(shí)驗過(guò)程中做好防護工作。